分光光度計法校準原理是將混合有特殊物質(zhì)的液體——即溶劑(英文solution)，通過移液器量取后注入目標容器，然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后，再對剩余的特定的波長的光進行測量，從而由此計算出移液器實際吸取和排出的液體——即溶劑。由分光光度法校準的原理可見，在采用分光光度法對移液器校準的過程中，可能對校準結果帶來影響的因素主要有：
1 溫度，因為分光光度法同樣需要使用到液體即溶劑，一定質(zhì)量量的溶劑，其容積同樣受到溫度的影響而變化。但如果在用戶所在的場所對移液器進行校準，則此影響可以不計，因為某一個具體用戶所在的場所內(nèi)的溫度變化，相對來說是固定的，那么這種由溫度帶來的影響，同樣也會存在于用戶實際工作中，因此這兩者是可以相互抵消的(乾蕓儀器科技有限公司備注：目前在該領域較為成熟的技術來自于美國一家實驗室);
2 氣壓，同溫度帶來的影響一樣，由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的;
3 操作人員的操作習慣帶來的影響，因為分光光度法是可以被直接在終端用戶使用場所應用的一種移液器校準方法，其操作方法相對于傳統(tǒng)的衡量法(或稱重法)更為簡單、可靠，因此*可由移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進行校準。這樣操作者的操作習慣在校準過程中表現(xiàn)出來的差異同樣存在與今后的使用過程中，這兩者之間的差異也可以相互抵消的;
4 環(huán)境濕度，因為分光光度法不是對移液器排出的溶劑進行稱量，而是對溶劑中所包含的特殊物質(zhì)的光波進行測量，同時這種特殊物質(zhì)是不可揮發(fā)的，因此在整個測試過程中，其已經(jīng)通過移液器排出的溶劑，無論其質(zhì)量如何變化，但結果是不會受到影響的，也就是不需要對環(huán)境的干濕度進行控制。
至此我們幾乎可以說，針對移液器采用分光光度發(fā)進行校準，其整個的測試過程是幾乎不受環(huán)境因素影響的，如溫度、氣壓、干濕度等，同時因在這一校準過程中，校準人和終使用人可以做到是同一人，從而因人的因素而帶來的差異也是降到低的。當然這種方法也不確定因素，比如分光光度法設備及使用的試劑自身也必然存在一定的誤差，這與傳統(tǒng)的衡量法(或稱重法)里測量儀器自身的誤差一樣，比如電子天平自身的誤差、溫度計自身的誤差、干濕度計以及氣壓計自身的誤差等，但這些來自于測量設備、溶劑自身的誤差，通常是恒定的，并且是可以事先測量、估算的，可以通過的測量數(shù)據(jù)進行修正的方法來避免的。
當然，目前分光光度法作為一種針對移液器校準的新的應用方法還是剛剛興起，在國外也只有少數(shù)研究機構或?qū)嶒炇以谑褂?，在我國目前僅停留在理論層面的評估上，并沒有在實際中推廣、應用。但因為分光光度法不受環(huán)境因素干擾，且設備攜帶方便，使得其應用環(huán)境更為隨意、寬廣，因此根據(jù)我們乾蕓儀器科技有限公司多年的行業(yè)經(jīng)驗認為，這種新型的針對移液器校準的方法，在不久的將來，將會得到更多用戶的肯定與承認。

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分光光度法校準原理